血清的保存條件及注意事項:
1、需要長期保存的血清得保存在-20-70的低溫冰箱中。4冰箱保存不超過一個月。由於血清在冷凍時體積會增加10%左右,所以在低溫冰箱中冷凍前得預留一定體積的空間,否則容易汙染或玻璃瓶凍裂。
2、熱滅活是指將完全解凍的血清在56加熱30分鍾。在加熱過程中,得定期均勻搖動。這種熱處理的目的是使血清中的補體失活。除非必要,一般不建議做這種熱處理,因為熱處理會造成血清沉澱物明顯增加,也會影響血清質量。
補體反應涉及:細胞毒性、平滑肌細胞收縮、肥大細胞和血小板釋放組胺、增強吞噬作用以及促進淋巴細胞和巨噬細胞的趨化和活化。
3、瓶裝血清需要逐步解凍。在3360-20至-70的低溫冰箱中的血清在4的冰箱中溶解一天。然後移至室溫,待完全溶解後分裝。在溶解的過程中,要輕搖均勻(注意不要產生氣泡),使溫度和成分均勻,減少沉澱的發生。不要直接將血清從-20解凍到37,因為溫度變化太大,容易導致蛋白質凝集沉澱。
4、一般廠家提供的血清是無菌的,不需要過濾滅菌。如果發現血清有懸浮固體,可以將血清加入培養液中,一起過濾,不要直接過濾血清。
5、血清中沉澱的絮狀物:主要是血清中的脂蛋白變性和解凍血清中的纖維蛋白引起的,這些絮狀物不會影響血清本身的質量。它可以通過以3000轉/分鍾離心5分鍾或不處理來去除。顯微鏡下,‘小黑點’:熱處理血清將顯著增加沉澱物的形成。