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    保存ATCC菌株的基本方法你還不知道嗎?

    2023-10-06

      ATCC菌株是從事微生物學和生命科學研究的基本材料。在醫學領域,診斷產品的製備、幼苗的生產和微生物致病性的研究。將含有1滴細胞懸浮液的管子放入含有氫氧化鉀或五氧化二磷吸水劑的大型試管中,用真空泵泵至1.3帕時密封保存大型試管。這是一種幹燥的保存方法,可以降低細胞死亡率,緩慢脫水,適用於各種細菌和真菌。


      無菌安瓿瓶每0.1~0.2毫升注入細胞懸浮液,在-40℃預凍1小時,然後在-20~30℃真空度為13.3帕的情況下脫水。脫水後,安瓿瓶外溫度可逐漸升至25℃。脫水後,樣品的含水量應低於3%。之後,將安瓿瓶保持1.3帕的真空度,用火焰溶解,保存10℃。為了防止ATCC菌株細胞在凍結脫水過程中受損或死亡,應使用保護劑製備細胞懸浮液。保護劑包括脫脂牛奶、血清、10%蔗糖或葡萄糖溶液等。然而,這種方法的功能是通過核細胞。


      使用甘油或二甲亞(DMSO)將細胞懸浮液作為保護劑製備,放入無菌安瓿中,每管0.2毫升,預凍至-40℃,控製溫度下降率為1℃/分鍾,然後將ATCC菌株立即放入液氮生物儲罐中保存氣相(-150℃)。恢複培養時,直接放入38℃的水浴中解凍5~10分鍾,然後種植在適當的培養基中。這是根據所有生化反應停止在-130℃以下,微生物無法進行代謝活動而設計的冷凍方法。為了避免冷凍、凍傷和細胞中形成大量冰晶,使用保護劑製備快速溶解的微生物,但在控製預冷凍時使用。


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