3M菌落總數測試片

　　1.操作方法

　　①沒有開封的時候，放在≤8℃冷藏，注意外包裝上的保質期。打開包裝時，應在室溫下。如果已經打開，用壓條或膠帶密封，放在室溫下，一個月內用完。

　　②將樣品放入無菌均質袋或均質杯中，加入無菌稀釋劑攪拌或均質樣品，用稀鹽酸或稀氫氧化鈉調節pH至6.5~7.2。

　　注：含有檸檬酸鹽、酸性亞硫酸鹽或硫代硫酸鹽的緩衝液不能用於無菌稀釋液，這會抑製細菌的生長。

　　③將測試片放在平坦的表麵，保持水平，揭開上層膜，將1毫升樣液垂直滴入移液器或滴管中心。然後慢慢把上層膜掉下來，盡量不要有氣泡，不要把上層膜往下滾。

　　④將壓板的圓形內凹麵朝下，放在上膜中央，然後輕輕按壓，使樣液均勻覆蓋在圓形培養基麵積上，切勿扭轉壓板。

　　⑤拿起壓板，靜置1分鍾以上，等待培養基凝固。然後測試片的透明麵朝上，*可以疊放20片，放置在36℃，培養48小時，保持培養箱的濕度。

　　2.判讀方法

　　①無論大小和顏色深淺，菌落總數測試片中都含有一種紅色指示染劑，能使菌落呈紅色，便於計數，計算出所有的紅色菌落。

　　②在25~250範圍內，3M檢測片菌落計數合適。

　　③測試片的計數麵積約為20cm2。每個黃色方框的麵積為1cm2。當菌落總數超過250時，可以選擇其中一個或幾個有代表性的小方框(1cm2)來估計菌落數。計算平均菌落數，然後乘以20得到測試片上的菌落數。

　　④如果測試片上的菌落太多而無法計數，則記錄為“TNTC”。

　　⑤菌落數量較高，使整個生長區域變成粉紅色，或者隻是觀察到生長邊緣區域的單一菌落，記錄為“TNTC”。

　　⑥菌落數量較高，有時菌落分布不均勻，記錄為“TNTC”。

　　⑦可以看到直徑較大的菌落，可以計數。但是，如果你仔細觀察，你會發現計數區域分布著非常密集和微小的菌落，此時記錄為“TNTC”。

　　⑧少量菌種會液化測試片上的培養基，計數區域會出現粉紅色的液化區。此時，液化區域內的紅點不應記錄。應選擇幾個沒有液化部分的有代表性的小方塊(1cm2)，而不是液化區域內的菌落進行計數。計算平均菌落數，然後乘以20。得到結果。

　　⑨注意樣品殘渣顆粒的區域。有些樣品含有一些紅色殘渣顆粒，菌落應該是紅色規則的圓形，而顆粒的形狀是不規則的。如果樣品主要是紅色顆粒(如辣椒粉)，則不應使用3M菌落總數測試片來檢測此類樣品的菌落總數。

　　3M大腸杆菌/大腸菌群測試片

　　1.操作方法

　　操作方法與3M菌落總數測試片基本相同，隻需將1毫升樣液加入中間紅色圓形區域，無需壓板，然後輕輕放下上膜，盡量不要產生氣泡。然後你可以輕輕轉動紙片，這樣樣液就可以均勻地分布在中間的紅色圓形區域。

　　2.判讀方法

　　大腸菌群在紙上呈現紅色菌落，緊貼菌落有氣泡，大腸杆菌在紙上呈現藍色菌落，緊貼菌落，有氣泡。這時候要注意區分隻有紅色或者藍色菌落沒有氣泡的情況，或者氣泡沒有緊貼菌落，或者隻有氣泡沒有菌落生長，不應該包括在計數範圍內。此外，還應區分樣品殘渣和目標菌落。